Diferente do que ocorre no processamento de amostra para observação e análise em microscopia óptica, na microscopia eletrônica os meios de infiltração e inclusão não são a parafina, mas sim um material que promova sustentação e rigidez às amostras a serem analisadas e que permita a posterior obtenção de cortes semifinos e ultrafinos. Várias substâncias são utilizadas como meios de inclusão em microscopia eletrônica. No entanto as resinas plásticas (epóxi) e acrílicas são as que têm sido mais comumente utilizadas. Essas resinas devem possuir características que facilitem a infiltração e, depois de polimerizadas, permitam a contrastação dos cortes e estes devem ser resistentes à incidência do feixe eletrônico do microscópio. Dentre as resinas acrílicas comercializadas, assinale a alternativa cuja resina apresente a definição a seguir:
Um derivado do metacrilato, foi desenvolvida para ser utilizada tanto em microscopia óptica quanto microscopia eletrônica. Essa resina não interage nem forma ligações cruzadas com proteínas ou ácidos nucléicos expostos na inclusão, assim favorecendo a detecção posterior destes componentes. Ela, também, é compatível com todos os solventes normalmente usados na desidratação e pode ser polimerizada por temperatura de 50ºC à 60°C ou por luz UV a baixa temperatura (-20°C).

A técnica de perfusão cardíaca é uma técnica de fixação tecidual muito utilizada para obtenção de material para exame diagnóstico ou estudo acadêmico e resulta em boas preparações histológicas, uma vez que simula o funcionamento do sistema circulatório para levar através dos vasos sanguíneos, soluções químicas que perfundem até os tecidos, preservando a sua estrutura de forma mais eficaz. Considerando os procedimentos necessários para a realização de uma boa perfusão cardíaca que garanta a obtenção de tecidos perfeitamente preservados durante a sua fixação, avalie as afirmativas a seguir:
I. A perfusão cardíaca consiste inicialmente na retirada da circulação sanguínea através da lavagem feita com uma solução salina de pH alcalino (pH 8,0) e anticoagulante, que é seguida da etapa de fixação feita pela injeção da solução fixadora. II. Tanto na injeção da solução de lavagem, quanto na solução fixadora, ambos os fluidos são impulsionados nos vasos sanguíneos através de tubos que se conectam a uma bomba peristáltica e a um grande vaso do animal a ser perfundido, como o arco aórtico, por exemplo. É importante regular a pressão de injeção da solução, a fim de não exceder a pressão sanguínea, para não haver a formação de artefatos devidos à fixação. III. A técnica da perfusão cardíaca, para ser bem-sucedida, um fator importante é a ausência de sangue coagulado nos vasos sanguíneos. Para isso, é conveniente administrar heparina diluída a 1:50 (v/v) ao animal 10 minutos antes do seu sacrifício. A filtração das soluções é, também, um cuidado que evita a obstrução dos pequenos vasos sanguíneos e a obstrução do fluxo das soluções através dos tecidos.
Assinale

Em microscopia óptica, a microtomia consiste em executar cortes bem finos com espessura de 3 a 6 micrômetros para a passagem de luz e observação do tecido ao microscópio. O equipamento utilizado para a obtenção desses cortes é o micrótomo. Embora existam vários tipos de micrótomos, o mais utilizado na técnica histológica de rotina é o micrótomo rotatório. Dentre as alternativas a seguir, assinale aquela que não corresponde a uma boa prática para a obtenção de cortes para análise à microscopia de luz.

A fixação é uma das etapas mais importantes da técnica histológica, porque interrompe o metabolismo celular, estabilizando as estruturas e os componentes bioquímicos intra e extracelulares, preservando e conservando os elementos teciduais, além de promover a penetração de outras substâncias subsequentes à fixação. Atualmente, os fixadores são classificados segundo Leong (1996), que teve como base a classificação desenvolvida por Hopwood (1977), sem muitas alterações. Segundo a classificação de Leong, com relação aos fixadores aldeídos, está correto afirmar que

As Boas Práticas de Laboratório correspondem a um conjunto de ações com o objetivo de promover a diminuição dos riscos do ambiente laboratorial. Essas medidas são constituídas por atividades organizacionais do ambiente de trabalho e por procedimentos básicos como a utilização de Equipamentos de Proteção Individual (EPI) e Equipamentos de Proteção Coletivos (EPC), limpeza e higienização do ambiente laboratorial, entre outras.
Nesse sentido, dentre as alternativas abaixo, assinale aquela que não corresponde a uma norma de biossegurança laboratorial.

Os distúrbios do crescimento celular são anomalias no desenvolvimento, proliferação, diferenciação ou apoptose das células. Esses distúrbios podem ter implicações significativas para a saúde e podem manifestar-se de várias maneiras, incluindo hiperplasia, hipoplasia, metaplasia, displasia e neoplasia. Dentre esses distúrbios, a neoplasia se caracteriza como uma proliferação anormal do tecido que ocorre devido ao aumento anormal do número de células. A neoplasia, conforme o seu comportamento biológico, é classificada como benignas ou malignas, como mostra a figura abaixo:


Considerando o que mostra a figura e o comportamento biológico das neoplasias benignas e malignas, assinale a alternativa correta.

O diagnóstico molecular é a aplicação de técnicas de biologia molecular para estudar doenças humanas, incluindo doenças infecciosas, condições hereditárias e câncer, visando à investigação de alvos de interesse a partir da análise genômica e proteômica, com o objetivo de identificar biomarcadores de doenças, criar melhores ensaios de diagnóstico, encontrar novos tratamentos e possíveis curas. Atualmente, o diagnóstico molecular de doenças pode ser dividido em duas técnicas de biologia molecular distintas: a técnica PCR (Polymerase Chain Reaction) e a tecnologia isotérmica. Sobre a metodologia dessas duas técnicas, analise as afirmativas a seguir:
I. A técnica PCR amplifica em milhares de vezes uma determinada região da molécula de DNA. Essa técnica tem como procedimento aquecer e depois resfriar a amostra para a obtenção do resultado. II. A tecnologia isotérmica é uma técnica que amplifica fragmentos de DNA de forma muito mais rápida para a detecção de diversos patógenos. Ela fornece resultados de diagnósticos em intervalos de tempo de até 15 minutos. III. A tecnologia isotérmica, como faz a técnica PCR, também realiza a amplificação de regiões da molécula de DNA. No entanto, ela apresenta um diferencial em relação à técnica PCR por não demandar o aquecimento e o resfriamento da amostra, ou seja, nela a temperatura não necessita de variação.
Assinale

O diagnóstico oncológico utiliza diversos parâmetros, entre eles, as avaliações clínica e histopatológica. O exame histopatológico é um dos melhores exames disponíveis para o diagnóstico confirmatório de tumor maligno, a avaliação de prognóstico e o direcionamento terapêutico para diferentes tumores. Quando diagnosticado, o tumor maligno, entre outras metodologias de avaliação, é classificado segundo o seu grau de diferenciação tumoral, que distingue cada tipo de tumor em relação ao tecido de origem de estadiamento. Assim, considerando a classificação do grau de diferenciação histológico dos tumores, assinale a alternativa correta.

Questão 35 O exame imuno-histoquímico é atualmente um poderoso instrumento diagnóstico, especialmente em biópsias para identificação de neoplasias primárias, metastáticas e doenças específicas de diferentes tipos de tecido. Entretanto, é perfeitamente conhecida a dificuldade técnica para a execução de reações em tecidos fixados e descalcificados por muito tempo. As técnicas atuais de recuperação antigênica permitiram, porém, a solução de grande parte desses problemas. A lista de antígenos a serem pesquisados é muito extensa e depende dos tipos celulares e doenças que necessitam identificação. Dentre os imunomarcadores apresentados nas alternativas abaixo, assinale aquela que apresenta apenas antígenos utilizados para o diagnóstico de linfomas Hodgkin e não Hodgkin.

A clivagem é realizada com a finalidade de reduzir as dimensões dos fragmentos dos tecidos coletados e, conforme o tipo de fixador utilizado, pode ocorrer em até algumas horas depois da fixação. Para uma boa análise histológica, devemos respeitar alguns procedimentos durante a clivagem, como os listados nas alternativas a seguir, à exceção de uma. Assinale-a.