Na reconstrução tridimensional a partir de cortes seriados, várias etapas do processamento são de vital importância para o sucesso da reconstrução da estrutura, tais como fixação, inclusão, trimagem do bloco e seleção correta da grade. A melhor condição para a visualização desses cortes seriados é a utilização da grade:

O material biológico incluído em resina epóxi, usado para análise ultraestrutural, pode ser guardado durante muito tempo sem prejuízo da amostra. Porém, para que reações imunocitoquímicas, para detecção de antígenos, sejam realizadas neste material, é necessário submetê-lo ao processo denominado desmascaramento de antígenos e sublimação, nas secções ultrafinas. Em relação às soluções abaixo relacionadas, é correto afirmar que todas podem ser usadas neste processo, EXCETO:

Analise o protocolo que descreve o tratamento de células para visualização ao microscópio eletrônico.

1 - congelamento da amostra com células.

2 - fratura das células congeladas.

3 - vaporização de platina (Pt) em um ângulo de 45° da superfície da amostra.

4 - evaporação de carbono (C) em ângulo de 90° sobre a amostra metalizada.

5 - tratamento da amostra com um solvente forte para retirar o material biológico.

6 - lavagem para retirada do solvente e colocação do produto final, filme de Pt/C, na grade para visualização ao microscópio.

Este protocolo permite a visualização da organização de proteínas inseridas em uma determinada estrutura celular. A imagem do produto final nos dá informação tridimensional desta organização. A opção que identifica corretamente o tipo de proteína, a estrutura celular observada e o microscópio utilizado para a visualização é:

Todos os fatores abaixo interferem na ultramicrotomia e resultam em cortes vibrados, EXCETO:

Considerando-se o poder de resolução do microscópio óptico e eletrônico, das opções abaixo aquela que apresenta estruturas visíveis somente através da utilização do microscópio eletrônico é:

Os elétrons responsáveis pela formação da imagem no MEV são os elétrons:

A microscopia eletrônica de varredura de duplo feixe (FIB-MEV) tem como principal vantagem para a biologia celular a capacidade de permitir a visualização de:

A fixação química é obtida pelo emprego de substâncias que reagem com determinados sítios das biomacromoléculas, estabilizando-as e impedindo alterações. Estes fixadores químicos podem ser classificados como coagulantes ou não coagulantes, de acordo com sua ação, gerando desnaturação ou estabilização estrutural da proteína, respectivamente; ou ainda em aditivo ou não aditivo, de acordo com sua capacidade de ser incorporado ou não às proteínas do tecido. Em relação a esta classificação, o exemplo INCORRETO de fixador não coagulante e aditivo é:

A imagem formada no MET é gerada por um feixe de:

Através do tamponamento de soluções fixadoras, a acidificação pode ser controlada, diminuindo o dano sobre a amostra. Os mais comumente usados no processamento para microscopia eletrônica são os tampões: