Questão 1228457

1228457 Ano: 2015
Disciplina: Técnicas em Laboratório
Banca: UFPA
Orgão: UFPA

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Técnico de Laboratório - Biologia
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A reação em cadeia da polimerase (PCR) é um processo utilizado para amplificar um gene de cópia única em milhões de cópias, a partir de uma pequena quantidade do DNA original (DNA molde). Nesse processo

o pré-requisito essencial é a determinação da região do gene que será amplificada. Em seguida, é desenhado e sintetizado um par de iniciadores (primers) complementares às regiões flanqueadoras da sequência a ser amplificada em cada fita do DNA.

ocorrem três etapas, na seguinte ordem: desnaturação, extensão e hibridização (“anelamento”), que juntas correspondem a um ciclo da reação.

normalmente são realizados de 25 a 35 ciclos para cada reação, na qual a taxa de amplificação é logarítmica. A enzima utilizada é uma DNA polimerase retirada de mamíferos, que suporta temperaturas de até 100ºC.

além da amplificação para clonagem molecular, a técnica de PCR possui outras aplicações, como: teste de paternidade, diagnóstico de doenças genéticas e infecciosas, diagnóstico citogenético, testes de organismos transgênicos, análise de polimorfismo de DNA.

além dos primers, da polimerase específica e do DNA molde, é necessário adicionar à reação somente água e solução de nucleotídeos.

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