O diagnóstico clínico da LTA pode ser feito com base na característica da lesão que o paciente apresenta, associado à anamnese.

Ao picar o hospedeiro vertebrado, o flebotomíneo inocula formas tripomastígotas metacíclicas provenientes da região anterior do trato digestivo.

A transmissão ocorre pela picada de insetos hematófagos pertencentes ao gênero Lutzomyia.

O teste de Montenegro é um método que avalia a resposta celular, ou seja, a reação de hipersensibilidade retardada do paciente.