O método considerado padrão-ouro para a dosagem de glicose é a o-toluidina, cujo princípio é baseado na capacidade redutora da glicose. Os oxidantes utilizados são cobre ou íon ferricianeto em meio alcalino reduzidos pela glicose a íon cuproso e íon ferrocianeto, respectivamente.

Os métodos enzimáticos que empregam enzimas como reativos, atualmente, têm seu uso restrito, depois que essas substâncias foram classificadas com carcinogênicas. No entanto, são considerados métodos simples e rápidos de executar, porém possuem uma baixa especificidade pela glicose.

Os sistemas enzimáticos mais empregados na dosagem de glicose são, teste de O´Sullivan, o-toluidina e hemoglobina glicada.

Os glicosímetros possuem um sistema de cartucho com fitas reagentes que utilizam o método de reconhecimento de hemoglobina glicada para a dosagem de glicose.

No método enzimático que emprega a enzima glicose oxidase, elevadas concentrações de ácido úrico, bilirrubina ou ácido ascórbico podem produzir falsos resultados reduzidos. Muitas dessas interferências são eliminadas pelo uso de 4-aminofenazona (método de Trinder).