O teste de fragilidade osmótica mede a intensidade de hemólise dos eritrócitos submetidos às soluções de NaCl em concentrações que variam de 0,1% a 0,9%. Esse teste é específico para anemia esferocítica e pode ser realizado da forma direta ou induzida, sendo que, na forma direta, o sangue deve ser coletado preferencialmente com o anticoagulante: