Na análise bacteriológica da água, para contagem padrão de bactérias heterotróficas, o ensaio inicia transferindo, com pipeta estéril, 1 ml da amostra para uma placa de Petri previamente esterilizada, após:

I - quando o meio de cultura se solidificar, incubar a placa em posição invertida a 35 ± 0,5º C durante 48 ± 3 horas.

II - no final do período de incubação, fazer a contagem das colônias com o auxílio de um contador de colônias.

III - homogeneizar o conteúdo da placa em movimentos circulares moderados em forma de ( ∞ ), em torno de 10 vezes consecutivas.

IV - entreabrir a placa e adicionar o meio de cultura, previamente fundido e estabilizado em banho-maria a 44-46ºC, contido no tubo de ensaio.

A sequência CORRETO do ensaio é: