nas células gram-negativas, a lavagem com álcool rompe a camada externa de lipopolissacarídeo, e os complexos CV-I (violeta-iodo) são removidos por meio da camada delgada de peptideolicano.

o corante vermelho carbolfucsina é aplicado a um esfregaço fixado, o qual é removido após tratamento com álcool-ácido, resultando em células gram-negativas.

Staphylococcus aureus é gram-positiva, enquanto que Escherichia coli, gram-negativa.

as bactérias são carregadas negativamente; portanto, o íon positivo colorido de um corante básico irá corar as suas células.