Deixar o sangue em infusão em água até o dia seguinte, a 40ºC. Cozinhar por 1 hora de 80 a 90 ºC.

Autoclavar a 121ºC por 30 minutos. Resfriar a 45ºC e juntar, com assepsia, 5% de sangue desfibinado de carneiro, estéril e aquecer a mistura sob agitação, a cerca de 80ºC, durante 15 minutos ou até que o meio fique da cor de chocolate.

Autoclavar a 121ºC por 15 minutos. Resfriar a 50ºC e juntar, com assepsia, 5% de sangue desfibinado de carneiro, estéril e aquecer a mistura sob agitação, a cerca de 80 ºC, durante 15 minutos ou até que o meio fique da cor de chocolate.

Autoclavar a 121ºC por 30 minutos. Resfriar a 45ºC e juntar 25 ml de sangue estéril de carneiro.