imagens de moléculas individuais que compõem a amostra, levando em consideração apenas o tamanho da molécula após localizar seu sinal de emissão de fluorescência.

localização espacial precisa de moléculas individuais através do cálculo do centroid, utilizando o sinal de fluorescência atribuído a cada molécula individualmente e posterior reconstrução da imagem.

calibração do tamanho das moléculas fluorescentes previamente ao experimento com a amostra de interesse e aplicação dessa calibração após a obtenção das imagens das amostras.

calibração do volume de observação com soluções de moléculas fluorescentes iguais às utilizadas para marcação da amostra e posterior deconvolução das imagens obtidas com as amostras marcadas.

utilização de óptica especial capaz de resolver detalhes de dimensões menores que o limite de difração da luz.