O método de dideoxinucleotídeos utiliza o grupo 3-hidroxila.

O método Sanger também é conhecido como sequenciamento de nova geração.

A presença de ddNTPs na reação dispensa a adição de desoxinucleotídeos trifosfato normais.

Os fragmentos resultantes são separados eletroforeticamente e submetidos à autorradiografia.

A utilização de vetores plasmidiais, em técnicas de subclonagem de fragmentos de DNA, é denominada “pirossequenciamento”.