A maioria das bactérias patogênicas fastidiosas crescem bem em caldo ou ágar Mueller-Hinton.

O pH do meio influenciará os resultados do teste, devendo estar levemente ácido, entre 6,5 e 6,8, para que sejam obtidos resultados acurados.

Para favorecer o crescimento de estreptococos, pode-se adicionar sangue de carneiro desfibrinado ou sangue de cavalo lisado ao meio (caldo ou ágar Mueller-Hinton), a uma concentração final de 2 a 5% (v/v).

O número de antibióticos que podem ser testados pelo método da diluição em microcaldo é similar ao utilizado na diluição em ágar.

Será constatada uma falsa resistência se a camada de ágar for muito rasa e, ao contrário, uma camada de ágar profunda resultará em falsa suscetibilidade.