Em pacientes que estão em antibioticoterapia, o momento da coleta deve anteceder a administração da próxima dose do medicamento.

A origem da amostra de sangue deve ser sempre informada.

Durante a coleta, deve-se fazer a antissepsia da tampa de borracha do frasco com álcool 70%, desprezar o algodão usado e deixar outro sobre a tampa até a inoculação do sangue.

A antissepsia da pele pode ser feita com álcool isopropílico a 70%, repetir a antissepsia com álcool 70% ou tintura de iodo entre 1 a 2% ou clorexidine alcoólico a 0,5%, deixando secar por um minuto.

É recomendada a coleta de hemocultura para o diagnóstico de bacteremia ou fungemia direto de cateter central.