O emprego de calor seco (121 ºC x 15 minutos) é indicado para a esterilização de ração, cama, gaiola de metal e de plástico, tampas de gaiolas, prateleiras, bebedouros e instrumentos cirúrgicos.

O emprego de calor úmido (160 ºC x 45 minutos) é indicado para a esterilização de instrumentos cirúrgicos, tampas de gaiolas, gaiolas de metal e cama.

O uso da radiação Gama (1-5 Mrads) é empregada rotineiramente para a esterilização de ração, gaiolas, seringas embaladas e material cirúrgico.

As diferentes áreas de um biotério (corredor de distribuição, salas de criação, corredor de recolhimento) deverão ser dotadas de um gradiente de pressão, sempre dos corredores para as salas de criação.

A eficiência de qualquer método de esterilização deve ser comprovada periodicamente por meio de indicadores químicos ou biológicos.