É utilizado o procedimento de cultura dessa bactéria, cuja colônia se apresenta com forte coloração avermelhada.

Escherichia coli, que reage quimicamente com o meio de cultura, produz gás sulfídrico com odor característico.

A presença de Escherichia coli pode ser confirmada com a reação positiva da bactéria ao substrato ONPG, através da produção de CO2.

Escherichia coli produz uma enzima que atua sobre o substrato MUG, formando um composto fluorescente.

A técnica que utiliza os substratos ONPG e MUG pode ser utilizada para análise quantitativa de Escherichia coli na amostra.