O método de Gram é uma das técnicas de colorações mais usadas em bacteriologia, podendo ser aplicado para caracterização e rastreamento da maioria das cepas de importância clínica. Nesse tipo de coloração, são utilizados quatro reagentes diferentes, como descrito a seguir:

I- O preparo das amostras se inicia com a coloração primária de um esfregaço de células fixado a uma lâmina histológica pelo calor. Esse corante primário cora as células com cor púrpura.

II- Logo após, as células são recobertas por uma solução de cristal violeta que age como um mordente, formando um complexo insolúvel ao se ligar ao corante primário.

III- As lâminas são lavadas com álcool-ácido, que descora seletivamente alguns tipos de células.

IV- Após lavagem com água, as células são coradas com cor-de-rosa por um contracorante, a safranina.

V- As bactérias denominadas Gram-positivas adquirem cor púrpura, enquanto as Gram-negativas apresentam coloração cor-de-rosa.

Está correto apenas o que se afirma em