Para uma boa fixação do espécime, é preciso que o fixador penetre nos tecidos, em suas diversas camadas, agindo em todas as células, não havendo a necessidade do conhecimento da dimensão do espécime a ser estudada.

Entre os fixadores pouco utilizados, podemos citar o formol (aldeído fórmico) a 10%, o glutaraldeído a ±4%, e a solução de Bouin, preparada a partir do formol.

Os cortes para observação em microscopia óptica são preparados geralmente com espessuras em torno de 4 a 6μm, através de um aparelho denominado autoclave.

O uso do etanol, benzol e xilol, como solventes de parafina, provoca também a dissolução dos lipídeos, presentes nos tecidos, o que motiva a substituição da técnica de impregnação de parafina pela técnica de congelamento.