Deve-se limpar as superfícies internas e externas da autoclave com esponja macia, água e sabão neutro, semanalmente ou sempre que apresentarem sujidade visível, e, em seguida, remover o sabão com um pano umedecido e secar com um pano limpo.

Na esterilização realizada em autoclave, os microrganismos são destruídos pela ação combinada de temperatura, pressão e umidade.

O material, devidamente embalado, deve ser colocado na câmara da autoclave desligada, não ultrapassando !$ \dfrac{2}{3} !$ de sua capacidade total, sem encostar-se às laterais, e dispondo-se os pacotes de modo que o vapor possa circular livremente e atinja todas as superfícies do material.

Os padrões de tempo, temperatura e pressão para esterilização pelo vapor variam de acordo com o aparelho e encontram-se de 121 ºC a 127 ºC (1 atm pressão) por quinze a trinta minutos e de 132 ºC a 134 ºC (2 atm pressão) por quatro a sete minutos de esterilização.

A esterilização realizada em autoclave é considerada como um processo químico.