São necessárias duas administrações venosas do radiofármaco (estresse e repouso).

A principal via de eliminação do 99mTc-Sestamibi é o sistema urinário.

O preparo para o exame inclui vestimenta adequada, dieta leve no dia do exame (2 horas de jejum, evitando jejum prolongado), não ingesta de alimentos e medicamentos estimulantes com cafeína e álcool.

O paciente deve ter uma punção venosa preparada para administração do radiofármaco.

As etapas de estresse e repouso podem ser realizadas em dias distintos (protocolo de dois dias) ou ambas em um único dia (protocolo de um dia).