As técnicas de diagnóstico molecular têm sido amplamente utilizadas para análise de agentes infecciosos. As vantagens dessas técnicas estão relacionadas à sua sensibilidade, especificidade e segurança. Avalie as afirmações sobre as técnicas de diagnóstico molecular especialmente àquelas relacionadas à detecção, amplificação e sequenciamento de ácidos nucleicos.
I- A técnica de hibridização in situ utiliza sondas de DNA capazes de detectar, em amostras de biópsia de tecidos fixados e permeabilizados, sequências genéticas específicas.
II- A técnica de DNA de cadeia ramificada é utilizada para determinar grandes quantidades de sequências específicas e deve ser utilizada apenas para análises que envolvam moléculas de DNA.
III- O sequenciamento de DNA de espécies microorganismos baseia-se no sequenciamento da subunidade ribossomal 16S e tem sido amplamente utilizado para distinguir cepas microbianas, como de influenza, por exemplo.
IV- A PCR (do inglês Polymerase chain reaction) é muito utilizada para detecção de muitos tipos de vírus, como retrovírus, herpesvírus e papilomavírus, que são vírus latentes ou que se encontram integrados ao genoma do hospedeiro.
V- A RT-PCR (Real Time PCR) é uma variação da PCR tradicional que relaciona a quantidade de DNA da amostra à velocidade de produção de novas moléculas de DNA na PCR. Ou seja, a cinética da reação proporcional à quantidade de DNA da amostra.
Está correto apenas o que se afirma em