A presença de mancha que se torna luminescente com auxílio de luz ultravioleta é um teste conclusivo para a presença de sêmen no local examinado.

O suporte no qual o material foi coletado deve ser preservado em solução NaCl 0,9%.

Os métodos de coloração Christmas Tree e Papanicolaou proporcionam resultados satisfatórios para a detecção citológica vaginal de espermatozóides.

A detecção de espermatozóides pode ser feita com o uso de vários tipos de microscópios, entre eles o microscópio óptico e o microscópio eletrônico. Contudo, o microscópio de campo escuro não fornece resultados satisfatórios.

Eosina amarela, eosina azul e hematoxilina-eosina são corantes vitais para espermatozóides.