A holoenzima de DNA polimerase tipo I é a principal enzima que polimeriza ou replica o DNA em bactérias, catalizando a adição de desoxirribonucleosídeos ao primer de RNA.

O DNA polimerase tipo II está envolvida no reparo do DNA bacteriano.

As topoisomerases são as enzimas que primeiro atuam na forquilha de replicação, promovendo a abertura da dupla fita por meio da quebra das ligações de hidrogênio.

Tanto os organismos procariontes, quanto os eucariontes iniciam a replicação em múltiplas regiões ricas em adenina e timina, denominadas origens de replicação, pois essas bases nitrogenadas fazem apenas duas ligações de hidrogênio entre si.