Devido à presença do âmnio nos ovos dos Testudines, o embrião está protegido contra desidratação e mudanças bruscas de temperatura, sendo, portanto, o sexo dos filhotes determinados pelos cromossomos sexuais e sem influência da temperatura de incubação.

A umidade do ninho de Testudines não tem influência sobre a temperatura, sendo que ninhos secos ou úmidos em baixas temperaturas (26,5–27ºC) sempre resultarão no desenvolvimento de fêmeas.

O efeito da temperatura na determinação do sexo dos Testudines está relacionado ao dimorfismo sexual no tamanho do adulto e, possivelmente, pela ativação e/ou desativação indireta de genes regulados pela temperatura e que controlam o desenvolvimento dos órgãos sexuais desses animais.

A determinação sexual dependente da temperatura nos Testudine é resultado de mutações nos cromossomos sexuais influenciadas pela luz UV.