O metotrexato é um medicamento que interfere na ação da diidrofolato redutase (DHFR), enzima essencial para a síntese de DNA e RNA, impedindo a proliferação de células cancerígenas e autoimunes. Por ser análogo estrutural do ácido fólico (vitamina B9), há facilidade na ligação do metotrexato ao sítio ativo na enzima DHFR. Na bioquímica, esse medicamento é classificado como: