as bactérias coradas por esta técnica pertencem a duas categorias distintas: Gram positivas e Gram negativas. A diferença básica de coloração entre os dois grupos é resultado da estrutura de suas paredes celulares.

o método consiste no tratamento de uma amostra de uma cultura bacteriana crescida em meio sólido ou líquido, com um corante primário, o lugol, seguido de tratamento com um fixador, o cristal violeta.

as bactérias Gram-positivas e as Gram-negativas absorvem de maneira diferente o corante primário e o fixador, adquirindo uma coloração azul devido à formação de um complexo cristal azuliodo, insolúvel, em seus citoplasmas.

o corante primário é a chamada fucsina básica, já o secundário é o cristal violeta.

ao microscópio, as células Gram-positivas aparecerão coradas em vermelho ou rosa escuro e as Gram-negativas em violeta escuro.