Entre as doenças pesquisadas no Teste do Pezinho, estão a fenilcetonúria, o hipotireoidismo congênito, a fibrose cística, a anemia falciforme e a cetoacidose diabética.

No preenchimento da ficha de coleta, deve-se informar se o recém-nascido foi alimentado com leite, pois a informação auxiliará no diagnóstico da hiperplasia adrenal congênita.

Em se tratando da região a ser puncionada, deve-se escolher a região central do calcanhar, evitando-se as laterais, realizando a punção com uma lanceta estéril descartável.

Além de auxiliar a interpretação de alguns resultados, a informação sobre prematuridade é essencial, uma vez que, para recém-nascidos abaixo de 37 semanas de idade gestacional, o exame deve ser repetido entre o 20.º e o 45.º dia de vida.

O papel-filtro com a amostra sanguínea deve ser encaminhado imediatamente ao laboratório para que se inicie a análise.