Para evitar diagnóstico incorreto de diabetes, o teste A1C deve ser realizado utilizando-se um método certificado pelo NGSP e padronizado ou rastreável para o ensaio do Diabetes Control and Complications Trial (DCCT).

A presença de hemoglobinas variantes, como observada nas hemoglobinopatias, hemodiálise, gravidez, tratamento do HIV e período pós-parto, não causa discordâncias entre os resultados de A1C e níveis de glicose plasmática.

Em pacientes com sintomas clássicos, a medida de glicose plasmática é suficiente para diagnosticar o diabetes, como sintomas de hiperglicemia ou crise hiperglicêmica mais glicose plasmática aleatória com valores iguais ou superiores a 200 mg/dL.

A A1C apresenta várias vantagens, comparada à glicemia plasmática em jejum e teste oral de tolerância à glicose (TOTG), como não requerer jejum, ter maior estabilidade pré-analítica e menor variação decorrente ao estresse, dieta ou doenças.