a determinação e/ou quantificação por espectrofotometria é feita por medição da quantidade de luz refletida pelo DNA em solução no comprimento de onda de 260 nm.

a concentração de DNA é inversamente proporcional a absorção de luz em um comprimento de onda específico.

é necessário realizar diluições das amostras de DNA na ordem de grandeza de 1 a 10 vezes para realizar a medição, uma vez que o volume das cubetas de espectrofotômetros é maior que as quantidades obtidas nas extrações.

é possível utilizar a referência do valor de absorbância (A) de 1,0 o qual corresponde a uma concentração de 50 µg de DNA (fita dupla) por mililitro (mL), para se calcular a concentração do DNA obtido das amostras.

determinados aparelhos específicos aplicados em medição da concentração de DNA utilizam apenas 10 µL de amostra sendo necessário a aplicação do fator de diluição.