O Treponema pallidum não pode ser visualizado por técnicas de microscopia que utilizem iluminação óptica comum, a não ser quando corado pela prata.

A utilização de um condensador de campo escuro aumenta a resolução do microscópio, permitindo a visualização do treponema com o uso de corantes específicos.

A reação de imunofluorescência direta tem como fundamento a reação específica de antígeno – anticorpo, com a utilização de soro hiperimune antitreponema marcado com isotiocianato de fluoresceína.

O teste de micro-hemaglutinação é uma técnica baseada na reação de aglutinação de eritrócitos de carneiro sensibilizados com antígenos do T. pallidum pelo soro com anticorpos anti-T. pallidum,

O VDRL detecta anticorpos antilipídicos (anticorpos não específicos), sendo um teste de floculação composto de cardiolipina, colesterol e lecitina.