O espectrofotômetro é instrumento utilizado em análises colorimétricas. Esta técnica visa determinar a concentração de uma substância pela medida da absorção relativa de luz, tomando como referência a absorção da substância numa concentração conhecida. A ilustração a seguir representa de forma simplificada o funcionamento de espectofotômetro de feixe simples.

Na ilustração, a solução problema e a seleção do comprimento de onda a ser usado na amostra estão representadas, respectivamente, por: