A lâmina, após o lugol, deve ser lavada com água destilada.

A exposição máxima da lâmina ao cristal violeta deve ser de 15 segundos.

A fucsina é o primeiro corante a ser acrescentado à lâmina, na técnica de Gram.

O óleo de imersão deve ser adicionado ao final do processo para observação no microscópio.

O lugol deve ser adicionado posteriormente ao cristal violeta e o tempo para reação é de 1(um) minuto.