A iniciação da tradução em eucariotos envolve a formação de um complexo entre o metionil-tRNA_i^met com a proteína fator de iniciação eucariótico 2 (eIF2), a qual se liga ao GTP. Esse complexo se ligará ao ribossomo (unidade 60S).

Durante a iniciação, o Met-tRNA_i^met liga-se ao ribossomo e ao sítio A.

Para que haja crescimento da cadeia polipeptídica à adição de aminoácidos, é necessário que ocorra a ligação de um aminoacil-tRNA ao sítio P.

A enzima peptidiltransferase catalisa a formação da ligação peptídica.

Durante a translocação, o GDP e o fator de alongamento são liberados do ribossomo.