A aplicação de anestésico tópico não deve ser realizada, devendo sempre ser utilizada infiltração com lidocaína na pele e tecido subcutâneo.

A aplicação deve ser realizada em posição sentada, com a criança posicionada com ajuda de um assistente, visando obter maior espaço intervertebral, menor movimentação e maior segurança do procedimento.

A agulha escolhida deve ser a de 3,75 cm (<2 anos), 6,25 cm (2 a 12 anos) e 8,75 cm (> 12 anos). Deve-se introduzi-la na pele, vencer uma delicada resistência, retirar o mandril, verificar a saída de LCR e, caso não ocorra resistência, girar a agulha.

A agulha deve ser introduzida na linha média com bisel paralelo ao eixo axial através do espaço correspondente à linha imaginária, traçada na altura da crista ilíaca (L1 a L2).