O cristal violeta cora em violeta tanto bactérias gram-positivas com as gram-negativas;

A solução de lugol gera a formação do complexo cristal violeta iodo (CVI) no interior da célula, tanto de bactérias gram-positivas, quanto nas gram-negativas;

A utilização da fucsina, a célula da bactéria gram-positiva não é afetada, permanecendo violeta, e na gram-negativa a célula adquire a cor do corante, tornando-se vermelha;

Com a utilização do álcool-acetona, nas bactérias gram-positivas há a extração dos lipídios da parede celular, aumento da porosidade e remoção do complexo cristal violeta iodo (CVI), e nas gram-negativas acontece desidratação da parede celular, diminuição da porosidade e da permeabilidade.