Os métodos de coloração são muito importantes na microbiologia, visto que facilitam a visualização das bactérias ao microscópio. Alguns métodos são denominados diferenciais, isto é, permitem a classificação das bactérias em “grupos”. A coloração de Gram é um desses métodos que permite classificar a maioria das bactérias em Gram positivas e Gram negativas. Sobre a coloração de Gram, é VERDADEIRO afirmar:

I) São utilizados quatro reagentes básicos, embora já existam muitas alterações do método original.

II) É composto por: corante básico (violeta de genciana ou cristal violeta); mordente (solução de iodo iodetada ou LUGOL); agente descorante (álcool etílico, acetona ou álcool-acetona 1/3); corante básico de fundo (fucsina básica diluída ou safranina).

III) As bactérias Gram positivas são identificadas com a cor rosada ou arroxeada, enquanto as Gram negativas apresentam uma coloração azul.

IV) A visualização da coloração azul nas bactérias se dá em função de serem descoradas pelo álcool, uma vez que possuem a parede celular espessa e os poros contraem-se na exposição ao lugol.

V) A coloração rosada ou arroxeada ocorre pelo fato de serem fixadas pelo álcool e coradas pela safranina ou fucsina. Portanto, a alternativa que contém a sequência correta é: