A possibilidade de editar genomas sempre foi muito desejada por parte dos cientistas. A seguir, são explicados alguns dos mecanismos:

- Meganucleases (endonucleases que reconhecem longas sequências específicas de DNA – 14-40 pares de bases), e as quebras nas duplas fitas geradas são reparadas pelo mecanismo de reparo de DNA não homólogo propenso a erros. Estes erros correspondem, por exemplo, ao mecanismo de inserir ou excluir aleatoriamente pedaços de DNA nos locais de quebra.

- As proteínas eucarióticas dedos de zinco (zinc fingers) são pequenos motivos protéicos dependentes do íon zinco e se ligam ao DNA de forma sequencial específica (3 pares de base). A combinação de 6 a 7 motivos de dedos de zinco poderia ter como alvo exclusivo qualquer sequência genômica de 18–21 pares de bases, uma vez que há um conjunto exclusivo de 64 possíveis combinações (4³ combinações) destes sítios de reconhecimento. Para o corte do DNA, foi adicionada a esta estrutura a sequência da Fok I endonuclease. Tal enzima foi selecionada dentre as outras, principalmente devido ao seu sítio de reconhecimento ser diferente do seu sítio de clivagem. Assim, o sítio de reconhecimento foi removido, sendo utilizado o reconhecimento oferecido pelas proteínas dedos de zinco.

- Um mecanismo semelhante ao anterior é encontrado nas proteínas da bactéria Xanthomonas efetores semelhantes aos ativadores de transcrição (TALE). A principal diferença entre eles é o número de bases que cada sistema reconhece. Enquanto o anterior necessita de 3 pares de bases para o reconhecimento, o presente requer 1 par de base de DNA para o reconhecimento. Da mesma forma que na abordagem anterior, os motivos protéicos foram fusionados, formando uma quimera com a Fok I endonuclease, gerando uma nuclease programável.

- O quarto mecanismo utilizado para a edição do DNA baseia-se na maquinaria procariótica que reconhece pequenas sequências palindrômicas de DNA que se organizam em grupos interespaçados (CRISPR). Neste caso, o reconhecimento da sequência-alvo se dá pela presença de um pequeno RNA guia associado à endonuclease Cas9.

Analise, a partir da leitura do texto acima, as seguintes afirmativas:

I - Todos os mecanismos se assemelham, pois visam à quebra da dupla fita de DNA.

II - As meganucleases são as melhores formas de se editar o genoma, pois as longas sequências específicas garantem a fidelidade do processo e a assertividade da sequência encontrada no DNA do hospedeiro.

III - O sistema CRISPR-Cas9 tem atraído muito a atenção dos pesquisadores, pois a sua forma de reconhecimento requer simplesmente uma sequência de RNA que pode ser sintetizada artificialmente e, portanto, não há a necessidade de edição do complexo protéico para alterar o sítio de reconhecimento.

IV - Estes sistemas constituem os chamados sistemas de defesa (imunidade) em procariotos e auxiliam estes organismos a combater patógenos, como, por exemplo, os bacteriófagos.

V - Independente da técnica utilizada, há de se garantir a integração sítio específica, ou seja, no local desejado, para que a edição consista de integração aleatória da cópia exógena em locos genômicos desejados.

Qual alternativa reúne as afirmações corretas?