Baseia-se no princípio da hemoaglutinação indireta pela reação de aglutininas específicas com aglutinogênios expressos na superfície de eritrócitos humanos.

Os reagentes antissoros necessitam atingir a temperatura ambiente antes de iniciar a reação, devendo ser armazenados em refrigerador, na temperatura de 0 a 10ºC.

Resultados falso positivos podem ser observados devido a anticorpos que reagem com drogas, corantes, compostos químicos ou com partículas de sílica coloidal produzida pela má qualidade dos frascos de vidro utilizados na sua embalagem.

Uma agitação excessiva, quando utilizada a técnica de tipagem em tubo, pode desagregar as aglutinações débeis e produzir resultados falso positivos.