É bem conhecido que o ajuste correto de um microscópio de luz deve seguir normas de regulagem do percurso da luz dentro de seu sistema para um melhor aproveitamento da luz e da formação de imagens nítidas, padronizadas por August Köhler em 1896. A sequência correta de ajuste do percurso da luz, a partir de sua fonte, para um microscópio de transiluminação, segundo método proposto por Köhler, é o seguinte:
