Para a dosagem de Aspartato Aminotransferase (AST), foi
preparado um reagente de trabalho contendo L-Aspartato e
NADH. Em um tubo de ensaio, adicionou-se 1,0 ml do
reagente e 100 µL da amostra. A mistura foi incubada a
37°C por 1 minuto em uma cubeta termostatada. Durante a
incubação, o espectrofotômetro foi ajustado (zero) a 340 nm
usando água destilada. Em seguida, registrou-se a
absorbância inicial (A1) e, após 2 minutos, a absorbância
final (A2). O mesmo procedimento foi realizado para o
padrão, substituindo a amostra por 100 µL do calibrador. A
variação de absorbância por minuto foi calculada como
ΔA/min = (A1 – A2)/2. O fator de conversão foi determinado
pelo quociente entre a atividade conhecida do calibrador e
seu ΔA/min, e a concentração de AST na amostra foi obtida
multiplicando-se o ΔA/min da amostra pelo fator. A técnica
descrita acima pode ser caracterizada como um método de
dosagem enzimática por: