A replicação é conservativa, cada fita atuando como molde para uma nova fita filha.

O DNA é sintetizado na direção 3’- 5’ pelas DNA-polimerases.

Na forquilha de replicação do DNA, a fita sintetizada continuamente seguindo a mesma direção do movimento da forquilha, origina os fragmentos de Okazaki.

Muitas células têm várias DNA-polimerases. Em E. coli, a DNA-polimerase III é a enzima de replicação principal. A DNA-polimerase I é responsável por funções especiais durante a replicação, recombinação e reparo.

A técnica de PCR (reação em cadeia da polimerase) baseia-se em DNA-polimerases. Entretanto, a DNA-polimerase utilizada na técnica de PCR (in vitro), sintetiza a nova fita de DNA no sentido 3’- 5’, enquanto a DNA-polimerase (in vivo) sintetiza a nova fita de DNA no sentido 5’ - 3’.