Os esfregaços são fixados, na rotina de laboratório, pelo calor, passando-se a lâmina com esfregaço rapidamente pela chama do bico de Bunsen.

Raramente, em laboratórios clínicos, usa-se coloração de esfregaços apenas com um corante, pois a coloração diferencial é mais satisfatória e fornece um número muito maior de informações.

As colorações de maior importância para a microbiologia são as de Gram e Ziehl Neelsen.

As bactérias se comportam como o material nuclear e, por isso, a maioria dos corantes utilizados na bacteriologia possuem características básicas.