Amostras de tecido contendo manchas secas devem ser mergulhadas em solução salina para retirada do extrato. Após centrifugação, o sedimento poderá ser analisado com as técnicas de microscopia.

Exames de identificação microscópica a fresco de espermatozóides podem ser efetuados com auxílio do corante eosina B.

No teste de reconhecimento microscópico de espermatozóides com auxílio do método de coloração conhecido como Christmas Tree, o corante Fast Red é utilizado para coloração do núcleo, enquanto que o corante Picro-Indigocarmin é utilizado para coloração da membrana plasmática.

Utilizando-se a técnica de coloração conhecida como Christmas Tree, o núcleo terá coloração rosa-escuro e a membrana plasmática terá coloração rosa-claro.

No preparo de lâminas coradas, o método de coloração conhecido como Christmas Tree é o mais indicado.