A análise de DNA por eletroforese é uma das técnicas fundamentais nos laboratórios de pesquisa e de diagnóstico. O princípio é baseado no fato de a molécula de DNA possuir carga negativa em valores de pH neutro ou alcalino e, consequentemente, quando aplicado ou imerso em uma matriz de gel submetida a um campo elétrico, migra em direção ao polo positivo (anodo). A velocidade da migração depende do tamanho da molécula. Por isso, em um dado momento da eletroforese, moléculas de tamanhos distintos se encontram em diferentes pontos da matriz. Em relação a essa técnica, analise as afirmativas seguintes.

I O método mais usual para se visualizar o DNA em géis de agarose é por coloração com brometo de etídeo (EtBr) de fórmula C21H20BrN3. Esse corante se intercala entre as bases dos ácidos nucleicos e, na presença de luz ultravioleta (entre 260 e 360nm), fluoresce em vermelho alaranjado (590nm).

II O brometo de etídeo pode ser utilizado somente aplicado diretamente no gel, pois não cora o DNA adequadamente quando adicionado no tampão da amostra a ser aplicada, ou usado após a corrida (quando o gel é submergido em solução de EtBr).

III Existem outros corantes fluorescentes atóxicos, que são boas opções alternativas para visualizar o DNA, em vez do EtBr, altamente mutagênico. Um exemplo é o Sybr Safe®, um corante fluorescente que cora o DNA no gel de agarose e no gel de poliacrilamida, exibindo a mesma sensibilidade que o brometo de etídeo e visualizado no transiluminador de luz azul.

IV Os grupos de moléculas de mesmo tamanho que migram na matriz de agarose assumem a forma do poço e constituem as formas chamadas de bandas de DNA. Após a visualização, os resultados geralmente são fotodocumentados. No caso de géis corados com brometo de etídio, as fotos devem ser adquiridas sob luz ultravioleta.

Estão corretas as afirmativas