É recomendada a realização da investigação de subgrupo de A, em doadores de sangue, quando houver resultados discrepantes entre as provas ABO direta e reversa ou na busca de concentrado de hemácias de subgrupo A2, para pacientes que apresentam anticorpo anti-A1 clinicamente significante.

Para a realização da pesquisa de antígeno D-fraco, recomenda-se a utilização de, no mínimo, dois antissoros anti-RhD (anti-D); pelo menos um desses antissoros deve conter anticorpos da classe IgM.

O registro de uma tipagem ABO e RhD prévia de um doador serve para a identificação das unidades de sangue subsequentemente doadas pelo mesmo doador, não sendo necessárias novas determinações a cada doação.

O antígeno RhD será determinado colocando- se as hemácias com antissoro anti-RhD (Anti-D); paralelamente, deve ser, sempre, efetuado um controle da tipagem RhD, utilizando-se soro-controle de distintos fabricantes, mas validados pelo serviço.