O paciente não necessita permanecer em jejum por 8 h antes da prova, pois a determinação de bilirrubina no soro não é afetada pela ingestão de alimentos.

O soro obtido tem que ser isento de hemólise, permitindo apenas uma lipemia, que não interfere na dosagem.

Até a realização do teste (no máximo 3 h após a colheita) o soro deve ser mantido no escuro.

Ácido ascórbico, aspirina e anticoncepcionais podem gerar resultados falsamente reduzidos.

Para esta determinação, o único método existente é o de Malloy-Evelyn.