A intensidade de fluorescência da amostra varia de maneira não linear lateralmente ao longo do plano focal observado, e linearmente ao longo do eixo óptico do microscópio (z).

A intensidade de fluorescência da amostra não varia ao longo na direção axial (z) do microscópio.

A intensidade de fluorescência da amostra aumenta de maneira quadrática sempre que nos afastamos do plano focal na direção axial (z) e do ponto central do volume de excitação, lateralmente (x,y).

A excitação é pontual e, portanto, não há variação da intensidade em qualquer direção a partir do volume de excitação.

A intensidade de fluorescência da amostra varia de maneira quadrática em relação à intensidade da luz de excitação e diminui de maneira quadrática conforme aumenta a distância do plano focal da objetiva na direção axial (z) do microscópio.