Após eliminação das interferências, a concentração de cafeína de uma amostra pode ser determinada por espectrofotometria na faixa do ultravioleta (UV), em um comprimento de onda de 275 nm. Uma curva de calibração para uma análise desse tipo é apresentada no gráfico a seguir.

A partir da curva de calibração obteve-se a equação de regressão que relaciona a absorbância (A) de uma solução com a concentração de cafeína ©:

A = 0,1836 x C - 0,0006

Supondo que uma amostra tenha uma concentração de cafeína igual a 1,0 mg.L^-1, o valor da transmitância (T) para essa amostra é dada por: