Assinale as afirmações abaixo, sobre técnicas de biologia molecular utilizadas para tipagem HLA, com V (verdadeiro) ou F (falso).

( ) A maioria dos métodos de sequenciamento (PCRSBT ou NGS) começam com uma etapa de PCR para aumentar a quantidade de DNA disponível para a reação posterior de sequenciamento.

( ) Na tipagem HLA por PCR-SSO (oligonucleotídeo sequência específica) reverso, o produto amplificado é adicionado a uma matriz sólida à qual as sondas (oligonucleotídeos) estão ligadas.

( ) Para verificar a inibição ou ausência de amplificação de uma reação de PCR-SSP, um controle interno polimórfico é adicionado a cada poço de reação.

( ) Uma das limitações da metodologia PCR-SSO reverso acontece quando o polimorfismo de determinado alelo encontra-se fora da região dos éxons amplificados, o que inviabiliza a identificação do alelo na amostra.

A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é