O cDNA é hibridizado a um dos primers, resultando na síntese da primeira fita.

A RT-PCR se baseia na amplificação de mRNA específico obtido de diferentes tipos de amostras.

A produção de cópias complementares de cDNA ocorre a partir da amostra de RNA pela transcriptase reversa.

Essa técnica repete a etapa de purificação do mRNA para as técnicas de clonagens convencionais.

Na técnica da RT-PCR, usa-se a transcriptase reversa, a amostra de RNA e os reagentes da PCR convencional.