Um grupo de estudantes de pós-graduação capturou peixes em um rio para estudar os efeitos da poluição, por meio de análises histopatológicas, utilizando microscopia de luz (óptica). Após a anestesia, eutanásia e coleta do fígado dos peixes, um dos estudantes ficou responsável por executar o protocolo de processamento das amostras, que incluía, entre outras etapas, as listadas a seguir:

- Imersão em parafina aquecida;
- Coloração com hematoxilina e eosina;
- Imersão em mistura contendo formaldeído a 4%;
- Imersão sequencial em frascos com uma série alcoólica crescente e xilol; - Imersão sequencial em frascos com xilol, série alcoólica decrescente e água;
- Fragmentação/corte do material biológico em pedaços com espessura de até 5 mm.

Ao observar as lâminas ao microscópio, os estudantes perceberam, com dificuldade, que os cortes histológicos estavam bem preservados, com estrutura histológica aparentemente íntegra, mas completamente transparentes, sem resquícios de coloração. Questionado sobre o procedimento, o responsável garantiu que havia realizado a etapa de coloração com hematoxilina e eosina, mas admitiu ter esquecido uma das outras etapas.

Qual etapa o estudante esqueceu de realizar?